森林立地学会誌 森林立地44(2), 2002, 15〜22
Jpn. J. For. environment44(2), 15-22 2002
FDA（フルオレセイン・ジアセテート）加水分解活性を用いた
森林土壌の微生物活性の簡易測定
市川貴大＊・高橋輝昌＊＊・浅野義人＊・小林達明＊＊
＊千葉大学大学院自然科学研究科・＊＊千葉大学園芸学部
迅速，簡易であるFDA加水分解活性法を用いた微生物活性の測定法を我が国の森林土壌に適用させるための一事例として，同一地質の微生物活性の異なる土壌を用いてFDA濃度の改変および測定条件について検討した。FDAの発色を波長490nmでの吸光度（A490）で表した。その結果，A490は0.25g乾土相当の生土をとり，pH7.6の0.06Mリン酸ナトリウム緩衝液を20mL加えたのち，FDA溶液を1.0mL程度加え，直ちに25℃の恒温器内で30分間振とうした後，直ちにアセトン20mLを加え，No.3のろ紙でろ過し，ろ液の490nmでの吸光度を測定することにより求められる。これにより測定されたA490は微生物バイオマス炭素量や土壌呼吸速度，糸状菌数，有機物分解能などを反映していた。これらのことから，A490は森林生態系内における分解者としての微生物活性を示す指標になるものと考えられる。
キーワード：FDA（フルオレセイン・ジアセテート），森林土壌，微生物活性，有機物分解能
Takahiro
Ichikawa, Terumasa Takahashi, Yoshito
Asano and Tatsuaki Kobayashi: A simple method of
measuring microbial activities in forest soil using a FDA(Fluorescein
Diacetate) hydrolysis.
In order to apply an easily and speedily method measuring microbial activities using FDA hydrolysis to forest soils, we improved the measuring condition using different from microbial activities soil on same geology. Fluorescence of FDA was measured by absorbance at 490nm(A490). 0.25g (dry weight) of soil was added to 20ml of 60mM sodium phosphate buffer (862.5mL of 0.06M Na2HPO4 +137.5mL of 0.06M NaH2PO4), pH7.6, then about 1ml of FDA solution (2mg/mL) was added. Immediately, the mixture solution was shaken at 25℃ for 30 minutes, and added with acetone to terminate the hydrolysis of FDA. Mixture solution filtered through no.3 filter paper was used to determine absorbance at 490nm. The resultant A490 reflected microbial biomass C, soil respiration rates, fungal counts and organic matter decomposition rates in soils. These results showed that A490 represented microbial activities as decomposer in forest ecosystem.
Key words: FDA(Fluorescein Diacetate), Forest
soil, Microbial activity, Organic matter decomposition rate